PCR儀即基因擴(kuò)增儀，實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制。主要由外殼、變溫反應(yīng)腔、散熱系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)、制冷系統(tǒng)、電子控制系統(tǒng)、供電系統(tǒng)、人機(jī)界面等各部分組成。
PCR儀的原理：
利用升溫使DNA變性，用限制性內(nèi)切酶使DNA雙鏈解鏈，在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈，進(jìn)而達(dá)到基因復(fù)制的目的。
PCR儀的技術(shù)特性：
1、加熱模式：立體膜加熱技術(shù)；
2、制冷技術(shù)：新一代“peltier”效應(yīng)“半導(dǎo)體熱泵制冷”；
3、控溫及管理：16位微機(jī)智能式；
4、單機(jī)操作，也可與電腦聯(lián)機(jī)使用，通過數(shù)據(jù)線可直觀顯示溫度變化曲線；
5、溫度范圍廣，除基本功能外還具備停電保護(hù)，長時(shí)間高低溫處理，低溫培養(yǎng)，循環(huán)套循環(huán)等各種增強(qiáng)功能，可用于各種條件要求的PCR實(shí)驗(yàn)。
PCR的分類：
根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn)可以將PCR儀分為：普通PCR儀，梯度PCR儀，原位PCR，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀等幾類。
1、普通PCR儀
一般把一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀，稱之為普通PCR儀，也就是傳統(tǒng)的PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運(yùn)行。普通PCR儀主要應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)、檢疫等。
2、梯度PCR儀
一次性PCR擴(kuò)增可設(shè)置一系列不同的退火溫度條件的稱之為梯度PCR儀。不同的DNA片段其適合的退火溫度不同，通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。
梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這樣既節(jié)約時(shí)間，也節(jié)約成本。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用，多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu),檢驗(yàn)、檢疫等。
3、原位PCR儀
原位PCR是保持細(xì)胞或組織的完整性，使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中，在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增。不但可以檢測到靶DNA，而且還可以了解靶DNA存在于何種細(xì)胞中，更有利于探討靶DNA與細(xì)胞之間的關(guān)系。
原位PCR儀主要應(yīng)用于：檢測外源性基因片段，提高檢出率，集中在病毒感染的檢查上；觀察病原體在體內(nèi)分布規(guī)律、內(nèi)源性基因片段；檢測導(dǎo)入基因；遺傳病基因檢測。
4、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
在普通PCR儀設(shè)計(jì)基礎(chǔ)上增加熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)，形成了具有熒光定量功能的PCR儀器。在PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記，使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)，得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。
熒光定量PCR儀有單通道，雙通道和多通道之分。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時(shí)候，選用單通道；有多種熒光標(biāo)記的時(shí)候使用多通道。多通道利于做多重PCR，實(shí)現(xiàn)一次檢測多種目的基因的功能。
熒光定量PCR儀主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。熒光定量檢測技術(shù)在臨床診斷方面很多，主要集中在各種病原體引起疾病的臨床診斷與優(yōu)生優(yōu)育相關(guān)的疾病以及肺結(jié)核等。
標(biāo)簽:
PCR儀
